ADC抗體篩選利器 | 高效評(píng)估內(nèi)吞與細(xì)胞毒性，一步到位！

日期: 2025-04-012025-11-05

近年來(lái)，抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）作為靶向癌癥治療的重要策略，受到了廣泛關(guān)注。ADC的治療效果依賴于抗體的特異性靶向能力、高效的內(nèi)化過(guò)程以及毒素載荷的釋放。因此，在ADC開發(fā)過(guò)程中，評(píng)估抗體-毒素復(fù)合物的內(nèi)化效率及其細(xì)胞毒性至關(guān)重要。為滿足這一研究需求，我們隆重推出創(chuàng)新型毒素偶聯(lián)IgG標(biāo)記試劑，該試劑專為ADC抗體篩選設(shè)計(jì)，可有效促進(jìn)ADC藥物開發(fā)進(jìn)程。

1.創(chuàng)新產(chǎn)品，雙重評(píng)估

傳統(tǒng)的抗體內(nèi)化檢測(cè)方法主要依賴于熒光標(biāo)記，但無(wú)法直接評(píng)估抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用。本試劑通過(guò)Fc結(jié)合蛋白偶聯(lián)毒素載荷，在評(píng)估抗體內(nèi)化能力的同時(shí)，量化其誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性，實(shí)現(xiàn)雙重檢測(cè)。

該方法提供了一種簡(jiǎn)便、高效的一站式解決方案，可用于 ADC 抗體篩選，并模擬 ADC 藥物的實(shí)際作用機(jī)制。(Figure 1)

Figure 1: Overview of the antibody internalization reagents, highlighting the pH sensitivity and payload conjugation.

1.1 毒素偶聯(lián)試劑作用機(jī)制

結(jié)合（Binding）： Fc結(jié)合蛋白偶聯(lián)毒素載荷后，與抗體特異性結(jié)合。

靶向（Targeting）： 形成的抗體-毒素復(fù)合物識(shí)別并結(jié)合細(xì)胞表面的特定靶蛋白。

內(nèi)吞（Internalization）： 復(fù)合物經(jīng)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。

細(xì)胞毒性（Cytotoxicity）： 毒素載荷在細(xì)胞內(nèi)釋放，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。細(xì)胞毒性可通過(guò)CCK-8比色法（CCK-8 assay）檢測(cè)，以評(píng)估細(xì)胞增殖抑制效果。

Figure 2: Step-by-step breakdown of how our antibody internalization reagent works.

1.2 兼容的 IgG 亞型

本試劑適用于多種 IgG 亞型，可靈活應(yīng)用于不同抗體的篩選需求。下表列出了可用于 AME100003 抗體內(nèi)化試劑?進(jìn)行篩選的 IgG 亞型：

Speies	Immunoglobulin	AME100003
Human	IgG(normal)	++++
	IgG1	++++
	IgG2	++++
	IgG3	–
	IgG4	++++
	IgM	–
	IgA	–
	IgE	–
	IgD	–
	Fab	++
	κ light chains	–
	L light chains	–
	ScFv	++
Mouse	IgG1	+
	IgG2a	++++
	IgG2b	+++
	IgG3	++
Rabbit	IgG	++++

2. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

適用范圍廣：可結(jié)合人、鼠、兔大多數(shù)IgG亞型，適用于多種抗體篩選需求。

真實(shí)模擬ADC機(jī)制：評(píng)估抗體的內(nèi)吞能力是否足以觸發(fā)細(xì)胞毒性，助力ADC藥物開發(fā)。

高效便捷：無(wú)需對(duì)每個(gè)抗體單獨(dú)偶聯(lián)毒素，大幅降低實(shí)驗(yàn)成本和復(fù)雜性。

靈活檢測(cè)：可結(jié)合熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀觀察內(nèi)吞情況，也可使用細(xì)胞活力檢測(cè)（CCK-8、MTT）評(píng)估毒素殺傷效果。

高穩(wěn)定性：加速穩(wěn)定性試驗(yàn)證明該試劑具有很高的穩(wěn)定性。(Figure 3).

Figure 3. Accelerated stability test of AME100003. Following lyophilization, samples were stored at -20°C (black), 37°C for 1 day (red), 37°C for 2 days (blue), and 37°C for 3 days (green), separately. Upon reconstitution, the cell inhibition rate of each sample was determined using the CCK8 method. The data indicate excellent stability for all samples.

3. 案例展示

我們使用該試劑評(píng)估了多款抗體的內(nèi)吞及細(xì)胞毒性，結(jié)果顯示：高內(nèi)吞抗體顯著增強(qiáng)MMAE毒素殺傷作用，而低內(nèi)吞抗體則細(xì)胞毒性較弱，與ADC藥物的實(shí)際篩選需求高度一致！

在本實(shí)驗(yàn)中，我們使用 AME100003 試劑對(duì)11 種靶向 CDH17 的單克隆抗體克隆進(jìn)行篩選，并在 CDH17 高表達(dá)的 SNU-5 細(xì)胞系中評(píng)估其內(nèi)化效率和細(xì)胞毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Clone 2、3 和 6 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性最顯著，被篩選為最佳 ADC 候選抗體。

CDH17 ADC 候選抗體篩選

Figure 4. Evaluation of cytotoxicity of different anti-CDH17 mAbs on SNU-5 cells.?Positive Control?BMK:?Benchmark antibody?against CDH17; Negative Control?LX: Benchmark antibody against GPRC5D.