1. 關(guān)于(G4S)n連接子
(G4S)n 連接子是指由1個或多個四個重復的 G4S(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser) 單元組成的柔性連接子。這種連接子因其適度長度和靈活性,廣泛應用于需要連接兩個蛋白或多肽的分子設計中。
1.1 結(jié)構(gòu)
氨基酸序列:(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)n 。
重復模塊:由1個或多個個相同的 G4S 模塊組成。
分子特性:①高柔性:甘氨酸提供了極大的旋轉(zhuǎn)自由度。
②疏水與親水性平衡:絲氨酸的羥基提供適度的親水性,有助于蛋白質(zhì)的溶解度。
1.2 功能
(G4S)n 連接子的主要功能在于連接兩個獨立的結(jié)構(gòu)域,同時保證它們的結(jié)構(gòu)和功能相對獨立。具體作用包括:
靈活連接:提供足夠長度和自由度,確保連接的分子間不發(fā)生不利的空間排斥。
穩(wěn)定分子功能:減少兩個結(jié)構(gòu)域之間的干擾,維持各自的天然折疊狀態(tài)和活性。
增強溶解性:通過絲氨酸引入的親水性,提升整體分子在水溶液中的溶解性。
1.3 優(yōu)點
長度適中:氨基酸長度足夠靈活,但不會導致連接分子間的相互作用完全喪失。
可預測性強:結(jié)構(gòu)簡單,生物學性質(zhì)穩(wěn)定,易于在表達系統(tǒng)中使用。
廣泛適用性:可用于從小分子多肽到大型蛋白的連接。
1.4 常見應用
1.4.1 融合蛋白
在融合蛋白的表達中,連接兩個蛋白或肽結(jié)構(gòu)域以提高表達效率或穩(wěn)定性。
(G4S)n提供柔性區(qū)域,使融合蛋白在溶液中具有更好的溶解性;避免由于剛性連接導致的折疊障礙或降解。

1.4.2 單鏈抗體(scFv)的優(yōu)化
在單鏈抗體設計中,連接輕鏈可變區(qū)(VL)和重鏈可變區(qū)(VH)以構(gòu)建 scFv。提供靈活性以確保 VL 和 VH 的正確折疊;增強抗體的結(jié)合能力和穩(wěn)定性。

1.4.3 雙特異性抗體
雙特異性抗體(BsAbs)通常需要連接兩個單鏈抗體片段(scFv)以實現(xiàn)雙靶點識別。(G4S)n連接子能夠提供足夠的空間,使兩個 scFv 保持獨立折疊和功能活性;降低片段之間的相互作用干擾;保證雙特異性抗體的靈活性和穩(wěn)定性。

1.4.4 CAR-T
(G4S)n 連接子主要用于 CAR 抗原結(jié)合域(如 scFv)的設計或優(yōu)化,以及某些特殊 CAR 的功能增強。特別適用于需要高親和力抗原識別的 CAR-T 設計,例如用于實體瘤的 CAR-T 療法。

2. Anti-(G4S)4應用及其優(yōu)勢
2.1 常見應用
Anti-(G4S)4抗體可識別(G4S)n柔性Linker(n≥2),常見應用如下:
蛋白質(zhì)表達檢測:流式細胞術(shù)(FACS)或酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)進行檢測。確保目標蛋白與熒光標簽或其他融合部分正確表達并含有完整的(G4S)4連接子。
CAR-T 細胞功能驗證:在 CAR-T 細胞中,抗(G4S)4抗體可用于檢測和量化包含(G4S)4連接子的 CAR 表達水平??捎糜诹魇郊毎g(shù)(FACS)分析或免疫染色,以評估 CAR-T。
(G4S)4連接子的穩(wěn)定性和功能研究:利用抗(G4S)4抗體研究連接子的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和與周圍分子環(huán)境的相互作用。
2.2. 優(yōu)勢
高特異性:抗(G4S)4抗體能夠精確識別(G4S)4連接子中的重復序列(如 GGGGS),避免與其他非特定序列交叉反應。在復雜樣品中檢測目標蛋白時,顯著降低非特異性背景干擾。
廣泛適用性:可用于多種實驗技術(shù)(如 ELISA、流式細胞術(shù)等),適配性強??山Y(jié)合不同的蛋白工程設計,用于基礎研究和應用開發(fā)。
實驗操作簡便:使用抗(G4S)4抗體時,無需針對每種目標蛋白單獨設計抗體,提高實驗效率。對于含有(G4S)4連接子的通用檢測,抗體生產(chǎn)和使用成本相對較低。
平臺兼容性強:抗(G4S)4抗體在哺乳動物細胞、細菌表達系統(tǒng)及酵母等多種生物系統(tǒng)中均可發(fā)揮作用。
3. 締碼Anti-(G4S)4抗體產(chǎn)品。
| Product Type | Cat No. | Product Name |
| Monoclonal antibodies | DME101144 | Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb |
| Biotin-labeled antibody | DME101144B | Biotinylated Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb |
| PE-conjugated antibody | DME101144P | PE-conjugated Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb |
部分數(shù)據(jù)
Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb(Cat#DME101144)

Flow cytometry analysis with Anti-(G4S)4 antibody(BM1049) on HEK293 cells transfected with BCMA CAR Abecma (Blue histogram) or HEK293 transfected with irrelevant protein (Red histogram).



