今年的2024 ASCO，驚喜不斷。其中有一項是由虞先濬教授團(tuán)隊開展的MRG004A-001研究，該研究是MRG004A（一款靶向組織因子TF/CD142 ADC藥物）在美國和中國正在進(jìn)行的首次人體劑量遞增和擴(kuò)展研究。研究結(jié)果顯示：在接受MRG004A 2.0mg/kg單藥治療12名可評估的胰腺癌患者中，客觀緩解率（ORR）達(dá)33.3%（4/12），疾病控制率（DCR）高達(dá)83.3%（10/12）。這一結(jié)果的公布，讓有最強(qiáng)癌王之稱的胰腺癌被突破成為可能，也讓組織因子TF這一靶點的關(guān)注度上漲。那組織因子TF究竟是什么？目前的相關(guān)靶向藥物布局又有哪些？

1、組織因子TF的結(jié)構(gòu)與分布

組織因子（TF），又稱為凝血因子III（Coagulation factor III）或CD142，在人類中由位于1號染色體p21.3的F3基因編碼，長度約為12.4kb。編碼組織因子TF蛋白的序列由六個外顯子組成。其中，外顯子1編碼前肽和翻譯起始位點；外顯子2-5編碼胞外結(jié)構(gòu)域；外顯子6編碼跨膜和胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域[1]。

如下圖所示，組織因子TF總共存在三種形式：flTF、asTF和替代外顯子1A-組織因子（TF-A）。人類flTF是由295aa組成的單次跨膜糖蛋白，包含三個結(jié)構(gòu)域：胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。胞外結(jié)構(gòu)域包含1-219aa，是由兩個纖連蛋白III型結(jié)構(gòu)域組成的N端部分，該結(jié)構(gòu)域可與因子VIIa形成復(fù)合物，并以膜依賴的方式使蛋白酶對其天然底物因子IX、因子X和因子VII的活性提高幾個數(shù)量級；跨膜結(jié)構(gòu)域包含220-242aa，主要功能是將組織因子TF錨定在膜上；胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域包含220-263aa，可進(jìn)一步參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[1]。asTF無跨膜結(jié)構(gòu)域，是可溶形式的組織因子，它是由組織因子mRNA 轉(zhuǎn)錄本選擇性剪接而產(chǎn)生的，其中外顯子5缺失，外顯子4直接剪接至外顯子6[2]。盡管asTF不是特別的促凝劑，但它參與非止血功能。與flTF相反，asTF可以在沒有FVII協(xié)助的情況下結(jié)合整合素。TF-A變體是通過第一個內(nèi)含子的可變剪接產(chǎn)生的 TF基因的新轉(zhuǎn)錄本。該過程導(dǎo)致包含一個來自第一個內(nèi)含子內(nèi)部序列的額外序列，稱為外顯子IA，稱為 TF-A [3]。

Figure 1. The structure of tissue factor (TF) [3]

組織因子TF由血管壁相關(guān)細(xì)胞組成性表達(dá)，包括血管平滑肌細(xì)胞、外膜成纖維細(xì)胞和周細(xì)胞。TF在胚胎發(fā)生中發(fā)揮作用，并在因子VII和VIIa之前在胚胎中表達(dá)。內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞一般不表達(dá)TF，但當(dāng)它們暴露在炎癥、動脈粥樣硬化、癌癥等病理條件下時，細(xì)胞表面會表達(dá)TF。

2、組織因子TF的作用

組織因子 (TF) 通常通過在血管損傷后啟動凝血級聯(lián)來保護(hù)組織的血管完整性，是凝血級聯(lián)反應(yīng)的主要啟動因子。在正常生理條件下，當(dāng)TF暴露于血流中時，TF在適當(dāng)磷脂膜上鈣離子存在下與活化因子 VII (FVIIa) 形成復(fù)合物，并通過變構(gòu)增強(qiáng)該蛋白酶的酶活性，催化因子 X (FX)活化為FXa。TF-FVIIa復(fù)合物產(chǎn)生FXa會觸發(fā)凝血酶的產(chǎn)生，隨后血小板被激活，并形成纖維蛋白凝塊，從而恢復(fù)血管完整性?，F(xiàn)在越來越多的證據(jù)表明，除了啟動止血作用外，F(xiàn)VIIa與TF 的結(jié)合還直接裂解蛋白酶激活受體PAR2，導(dǎo)致TF胞質(zhì)域磷酸化。這隨后抑制了 PAR-2 介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)的負(fù)調(diào)控，從而促進(jìn)血管生成[4]。

Figure 2. The role and mechanism of TF [4]

3、組織因子TF與癌癥

如前所述，TF在多種癌細(xì)胞表面高表達(dá)，它在癌癥的進(jìn)展，癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移和血管生成中發(fā)揮作用。如下圖所示，TF可通過激活JAK2-STAT5通路導(dǎo)致癌細(xì)胞不受控制地生長，繼而阻止癌細(xì)胞凋亡；也可通過激活RTKs促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長；TF還可通過增加VEGF、抑制TSP導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的血管生成和轉(zhuǎn)移增加；另外，TF可以激活rac1，rac1可進(jìn)一步活化PKA從而調(diào)控MAPK，導(dǎo)致癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移；TF亦可激活PAR2，PAR2又通過多種方式導(dǎo)致癌細(xì)胞的血管生成、侵襲和轉(zhuǎn)移增強(qiáng)。PAR2一方面通過增加VEGF、bEGF、 IL8和βTGF來促進(jìn)血管生成、癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移；另一方面，PAR2可以穩(wěn)定β-catenin并引起腫瘤細(xì)胞的侵襲。此外，PAR2還能通過激活MAPK和ERK1/2通路來增加 β-arrestin，從而磷酸化肌動蛋白絲切蛋白，導(dǎo)致侵襲細(xì)胞邊緣的肌動蛋白絲聚合，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

Figure 3. Overview of factors affecting F3 gene and TF-involved signaling pathways progressing cancer [3]

4、組織因子TF靶向療法研究進(jìn)展

由于TF在許多腫瘤中高表達(dá)，但在正常組織血管內(nèi)壁的內(nèi)皮細(xì)胞中不表達(dá)，因此靶向TF的藥物可以被定向傳遞到腫瘤細(xì)胞而不靶向正常組織細(xì)胞，TF可作為ADC藥物的理想靶點。全球范圍內(nèi)，目前針對TF的在研新藥項目較少，且均為ADC藥物。其中，由Genmab與Seagen聯(lián)合開發(fā)的Tisotumab vedotin已于2021年9月獲批上市。由上海信諾維生物開發(fā)的XNW-28012目前正處于臨床I期；由樂普生物開發(fā)的MRG004A處于臨床II期；由Iconic Therapeutics開發(fā)的XB002目前處于臨床Ⅰ/II期。

• Tisotumab vedotin

Tisotumab vedotin，商品名為Tivdak，是由Seagen和GenMab聯(lián)合開發(fā)的一款靶向組織因子TF的ADC藥物，也是首個靶向TF的ADC藥物。Tisotumab vedotin由三部分組成，包括抗組織因子的單克隆抗體Tisotumab、可剪切多肽連接子和細(xì)胞毒素單甲基奧瑞他汀E （MMAE），DAR=4。當(dāng)Tisotumab vedotin與TF陽性腫瘤細(xì)胞相互作用時，它會被內(nèi)化并發(fā)生溶酶體降解，從而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)釋放 MMAE。MMAE是一種強(qiáng)效抗微管劑，可與微管蛋白結(jié)合并中斷微管聚合，在G2/M期誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯，從而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡；此外，MMAE還可以通過導(dǎo)致鄰近細(xì)胞死亡（旁觀者效應(yīng)）在腫瘤微環(huán)境中被釋放到細(xì)胞外[5]。

Figure 4. The mechanism of tisotumab vedotin [5]

該藥于2021年9月20日獲FDA加速批準(zhǔn)上市，適應(yīng)癥為二線治療復(fù)發(fā)性或轉(zhuǎn)移性宮頸癌成年患者，獲批依據(jù)是公布的關(guān)鍵試驗 ENGOT-cx6/GOG-3023/innovaTV 204 結(jié)果。該結(jié)果表明，在接受鉑類方案治療后病情進(jìn)展的復(fù)發(fā)性或轉(zhuǎn)移性宮頸癌女性中，ORR為24%，且反應(yīng)持續(xù)時間較長[5]。2022年9月，再鼎醫(yī)藥與Seagen達(dá)成合作協(xié)議，獲得在中國內(nèi)地、香港、澳門和臺灣地區(qū)開發(fā)和商業(yè)化tisotumab vedotin的獨家授權(quán)。

• XNW-28012

XNW-28012是由上海信諾維生物醫(yī)藥開發(fā)的一款靶向TF的ADC藥物。目前關(guān)于這款A(yù)DC藥物的描述并不多，有報道稱XNW-28012小分子部分使用宜聯(lián)生物TMALIN平臺，Payload為YL0014。2023年7-8月，XNW28012先后獲得CDE和FDA批準(zhǔn)臨床試驗，主要用于治療實體瘤。據(jù)其官方展示的非臨床研究顯示，XNW28012在TF高表達(dá)的多種實體瘤模型中展現(xiàn)出了良好抗腫瘤活性，且安全性特征良好，整體安全性可控。目前，官網(wǎng)顯示的最高臨床階段為臨床I期。

• MRG004A

MRG004A是由樂普生物開發(fā)的一種新型靶向組織因子（TF）的特異性ADC藥物，該ADC藥物采用Synaffix公司的定點偶聯(lián)技術(shù)，DAR值為4。2023年12月，MRG004A用于治療胰腺癌適應(yīng)癥獲得FDA授予孤兒藥資格認(rèn)定。2024年3月，樂普生物公布MRG004A已獲FDA授予快速通道資格，用于治療胰腺癌。目前MRG004A正在美國及中國進(jìn)行I/II期臨床研究NCT04843709，在ASCO2024會議上公布了中期臨床數(shù)據(jù)。

• XB002

XB002是Zymeworks與Exelixis合作開發(fā)靶向于組織因子TF的ADC藥物，Payload為MMAE類似物。該藥最初是由Iconic Therapeutics使用Zymeworks的ZymeLink?技術(shù)研發(fā)，2019年Exelixis與Iconic達(dá)成合作協(xié)議，獲得了XB002的開發(fā)權(quán)益。XB002目前正在開展I期試驗（NCT04925284）。

5、締碼TF相關(guān)產(chǎn)品助力TF生物藥研發(fā)

締碼生物科技有限公司是一家專注于可成藥靶點臨床前研發(fā)產(chǎn)品和服務(wù)的生物技術(shù)公司。締碼現(xiàn)可提供TF靶點全系列產(chǎn)品與服務(wù)。產(chǎn)品包括活性蛋白、參照抗體、流式驗證單克隆抗體和穩(wěn)賺細(xì)胞株；服務(wù)涵蓋多種屬蛋白抗體定制服務(wù)、抗體人源化和親和力成熟服務(wù)。此外，為加速TF生物療法的開發(fā)，締碼還制備了TF靶點單B細(xì)胞種子庫，最快28天可獲得先導(dǎo)抗體分子。

• 蛋白&抗體&穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株產(chǎn)品

產(chǎn)品類型	產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱
重組蛋白	PME100751	Human CD142 Protein, hFc Tag
流式驗證抗體	DMC100463	Anti-CD142 antibody(DMC463); IgG1 Chimeric mAb
參照抗體	BME100124	Anti-CD142(tisotumab biosimilar) mAb
生物素標(biāo)記抗體	BME100124B	Biotinylated Anti-CD142(tisotumab biosimilar) mAb
	DMC100463B	Biotinylated Anti-CD142 antibody(DMC463); IgG1 Chimeric mAb
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株	CEL100049	Hu_CD142 K562 Cell Line

• TF/CD142先導(dǎo)分子開發(fā)進(jìn)展

參考文獻(xiàn)：
[1]Butenas, Saulius. Tissue factor structure and function. Scientifica vol. 2012 (2012): 964862.
[2]Bogdanov VY, Balasubramanian V, Hathcock J, et al. Alternatively spliced human tissue factor: a circulating, soluble, thrombogenic protein. Nat Med. 2003 Apr;9(4):458-62.
[3]Ahmadi, S. E., Shabannezhad, A., Kahrizi, A., et al. Tissue factor (coagulation factor III): a potential double-edge molecule to be targeted and re-targeted toward cancer. Biomarker research, 2023, 11(1), 60.
[4]Mackman, N., & Taubman, M. Tissue factor: past, present, and future. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology, 2009, 29(12), 1986–1988.
[5]Agostinelli, V., Musacchio, L., Camarda, F., et al. Therapeutic Potential of Tisotumab Vedotin in the Treatment of Recurrent or Metastatic Cervical Cancer: A Short Report on the Emerging Data. Cancer management and research, 2023, 15, 1063–1072.