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全長膜蛋白表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)是一種用于研究全長膜蛋白與其配體(如小分子、蛋白質(zhì)、多肽,抗體等)相互作用的生物物理分析技術(shù)。研究全長膜蛋白與其配體的相互作用對于藥物開發(fā)和生物學(xué)研究具有重要意義。
表面等離子共振(SPR)是一種通過實(shí)時測定液相和固相界面上分子互作復(fù)合物形成時偏振光共振角(SPR Angle)的變化來定量供試品中待測物的方法。全長膜蛋白因其強(qiáng)疏水性,常需要存在于磷脂雙分子層中,以保持其天然構(gòu)象和功能。締碼生物憑借多年的全長膜蛋白開發(fā)經(jīng)驗(yàn),品種覆蓋GPCR、CLDN、離子通道等多個家族,并提供超過1000種全長膜蛋白納米盤(nanodiscs)的現(xiàn)貨產(chǎn)品,其活性和功能均已得到驗(yàn)證。基于全長膜蛋白納米盤(nanodiscs)的特性,締碼生物開發(fā)了多款專用于固定全長膜蛋白的芯片,為制藥企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)的SPR檢測提供了有力支持。當(dāng)配體與全長膜蛋白結(jié)合后,會引起芯片表面折射率的變化,SPR檢測器可以實(shí)時監(jiān)測這種變化,生成響應(yīng)曲線(sensorgram),用于分析結(jié)合動力學(xué)參數(shù),如結(jié)合常數(shù)(KD)、結(jié)合速率常數(shù)(kon)和解離速率常數(shù)(koff)。
SPR技術(shù)檢測原理示意圖
GPCR膜蛋白示意圖
CLDN膜蛋白示意圖
離子通道膜蛋白示意圖
全長膜蛋白SPR檢測的關(guān)鍵挑戰(zhàn)在于固定方法和檢測方法的確定。傳統(tǒng)芯片在固定全長膜蛋白時,往往難以同時滿足有效固定和保持全長膜蛋白方向性與功能性的要求。為了解這一難題,締碼生物憑借對全長膜蛋白特性的深度理解,開發(fā)了多種方法來滿足全長膜蛋白SPR檢測,并投入大量精力探索出一條適合全長膜蛋白納米盤(Nanodisc)的SPR檢測方法,并推出全長膜蛋白SPR分析測試服務(wù),為客戶提供成熟、可靠的解決方案,有效地幫助客戶避免因?qū)θL膜蛋白納米盤特性不熟悉而找不到合適SPR方法的困擾,或者有些客戶在委托傳統(tǒng)CRO公司進(jìn)行SPR服務(wù)時,由于其缺乏對全長膜蛋白納米盤(Nanodisc)的深度理解,同樣會遭受屢次失敗的困擾。歡迎廣大科研工作者咨詢詳情。
在篩選針對多跨全長膜蛋白的治療性抗體時,需要篩選出親和力較高的抗體,以確保其具備更好的功能特性。通過測定和比較抗體與全長膜蛋白的SPR活性,可以為篩選優(yōu)質(zhì)治療性抗體提供有效的解決方案。
Magrolimab(SKU: BME100001?) binding with Human CD47 (SKU:?FLP100039) with an affinity constant of 0.168 nM
Synthetic Nanodisc表達(dá)的全長膜蛋白與多肽結(jié)合的活性測試,也是常見的一種生物大分子互作檢測手段。
Peptide binding with Synthetic Nanodisc with an affinity constant of 40.8 nM
治療性抗體與全長膜蛋白的結(jié)合活性測試。
Loaded Human CLDN18.2 monoclonal antibody (BME100075) on Pro-A Biosensor, can bind human CLDN18.2-Strep full length protein-synthetic nanodisc (FLP120014) with an affinity constant of 8.09nM as determined in SPR assay.
Li, J., et al., Heat acclimation defense against exertional heat stroke by improving the function of preoptic TRPV1 neurons. Theranostics, 2025.?15(4): p. 1376-1398.?
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