1. 關(guān)于(G4S)n連接子

(G4S)n 連接子是指由1個或多個四個重復(fù)的 G4S（Gly-Gly-Gly-Gly-Ser） 單元組成的柔性連接子。這種連接子因其適度長度和靈活性，廣泛應(yīng)用于需要連接兩個蛋白或多肽的分子設(shè)計中。

1.1 結(jié)構(gòu)

氨基酸序列：(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)n 。

重復(fù)模塊：由1個或多個個相同的 G4S 模塊組成。

分子特性：①高柔性：甘氨酸提供了極大的旋轉(zhuǎn)自由度。

②疏水與親水性平衡：絲氨酸的羥基提供適度的親水性，有助于蛋白質(zhì)的溶解度。

1.2 功能

(G4S)n 連接子的主要功能在于連接兩個獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域，同時保證它們的結(jié)構(gòu)和功能相對獨(dú)立。具體作用包括：

靈活連接：提供足夠長度和自由度，確保連接的分子間不發(fā)生不利的空間排斥。

穩(wěn)定分子功能：減少兩個結(jié)構(gòu)域之間的干擾，維持各自的天然折疊狀態(tài)和活性。

增強(qiáng)溶解性：通過絲氨酸引入的親水性，提升整體分子在水溶液中的溶解性。

1.3 優(yōu)點(diǎn)

長度適中：氨基酸長度足夠靈活，但不會導(dǎo)致連接分子間的相互作用完全喪失。

可預(yù)測性強(qiáng)：結(jié)構(gòu)簡單，生物學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，易于在表達(dá)系統(tǒng)中使用。

廣泛適用性：可用于從小分子多肽到大型蛋白的連接。

1.4 常見應(yīng)用

1.4.1 融合蛋白

在融合蛋白的表達(dá)中，連接兩個蛋白或肽結(jié)構(gòu)域以提高表達(dá)效率或穩(wěn)定性。

(G4S)n提供柔性區(qū)域，使融合蛋白在溶液中具有更好的溶解性；避免由于剛性連接導(dǎo)致的折疊障礙或降解。

1.4.2 單鏈抗體（scFv）的優(yōu)化

在單鏈抗體設(shè)計中，連接輕鏈可變區(qū)（VL）和重鏈可變區(qū)（VH）以構(gòu)建 scFv。提供靈活性以確保 VL 和 VH 的正確折疊；增強(qiáng)抗體的結(jié)合能力和穩(wěn)定性。

1.4.3 雙特異性抗體

雙特異性抗體（BsAbs）通常需要連接兩個單鏈抗體片段（scFv）以實(shí)現(xiàn)雙靶點(diǎn)識別。(G4S)n連接子能夠提供足夠的空間，使兩個 scFv 保持獨(dú)立折疊和功能活性；降低片段之間的相互作用干擾；保證雙特異性抗體的靈活性和穩(wěn)定性。

1.4.4 CAR-T

(G4S)n 連接子主要用于 CAR 抗原結(jié)合域（如 scFv）的設(shè)計或優(yōu)化，以及某些特殊 CAR 的功能增強(qiáng)。特別適用于需要高親和力抗原識別的 CAR-T 設(shè)計，例如用于實(shí)體瘤的 CAR-T 療法。

2. Anti-(G4S)4應(yīng)用及其優(yōu)勢

2.1 常見應(yīng)用

Anti-(G4S)4抗體可識別(G4S)n柔性Linker（n≥2），常見應(yīng)用如下：

蛋白質(zhì)表達(dá)檢測：流式細(xì)胞術(shù)（FACS）或酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行檢測。確保目標(biāo)蛋白與熒光標(biāo)簽或其他融合部分正確表達(dá)并含有完整的(G4S)4連接子。

CAR-T 細(xì)胞功能驗(yàn)證：在 CAR-T 細(xì)胞中，抗(G4S)4抗體可用于檢測和量化包含(G4S)4連接子的 CAR 表達(dá)水平。可用于流式細(xì)胞術(shù)（FACS）分析或免疫染色，以評估 CAR-T。

(G4S)4連接子的穩(wěn)定性和功能研究：利用抗(G4S)4抗體研究連接子的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和與周圍分子環(huán)境的相互作用。

2.2. 優(yōu)勢

高特異性：抗(G4S)4抗體能夠精確識別(G4S)4連接子中的重復(fù)序列（如 GGGGS），避免與其他非特定序列交叉反應(yīng)。在復(fù)雜樣品中檢測目標(biāo)蛋白時，顯著降低非特異性背景干擾。

廣泛適用性：可用于多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)（如 ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等），適配性強(qiáng)?？山Y(jié)合不同的蛋白工程設(shè)計，用于基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開發(fā)。

實(shí)驗(yàn)操作簡便：使用抗(G4S)4抗體時，無需針對每種目標(biāo)蛋白單獨(dú)設(shè)計抗體，提高實(shí)驗(yàn)效率。對于含有(G4S)4連接子的通用檢測，抗體生產(chǎn)和使用成本相對較低。

平臺兼容性強(qiáng)：抗(G4S)4抗體在哺乳動物細(xì)胞、細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)及酵母等多種生物系統(tǒng)中均可發(fā)揮作用。

3. 締碼Anti-(G4S)4抗體產(chǎn)品。

Product Type	Cat No.	Product Name
Monoclonal antibodies	DME101144	Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb
Biotin-labeled antibody	DME101144B	Biotinylated Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb
PE-conjugated antibody	DME101144P	PE-conjugated Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb

部分?jǐn)?shù)據(jù)

Anti-(G4S)4 antibody(BM1049), Rabbit mAb（Cat#DME101144）

Flow cytometry analysis with Anti-(G4S)4 antibody(BM1049) on HEK293 cells transfected with BCMA CAR Abecma (Blue histogram) or HEK293 transfected with irrelevant protein (Red histogram).