2024年3月，一篇題為“Raludotatug Deruxtecan, a CDH6-Targeting Antibody–Drug Conjugate with a DNA Topoisomerase I Inhibitor DXd, Is Efficacious in Human Ovarian and Kidney Cancer Models”的臨床前研究發(fā)表在《Mol Cancer Ther》上。該研究表明，Raludotatug Deruxtecan，一款有第一三共開發(fā)的CDH6 ADC藥物對人類卵巢癌和腎癌模型有效。此前，在2023 ESMO大會上也公布了Raludotatug Deruxtecan單藥治療既往經(jīng)治卵巢癌患者的首次人體I期研究（NCT04707248）亞組分析結(jié)果，結(jié)果顯示確認(rèn)客觀緩解率46%，疾病控制率可達(dá)98%。既然CDH6如此優(yōu)秀，那我們就來聊聊背景和當(dāng)前靶向藥布局吧。

1、CDH6與經(jīng)典鈣粘蛋白

鈣粘附蛋白6（CDH6），又稱為胎兒腎鈣粘蛋白或K-鈣黏蛋白，是由790個(gè)氨基酸構(gòu)成的單次跨膜蛋白，屬于II型經(jīng)典鈣黏蛋白，為鈣粘蛋白超家族成員之一。鈣粘蛋白超家族由四個(gè)主要亞家族組成：經(jīng)典鈣粘蛋白、橋粒鈣粘蛋白、原鈣粘蛋白和非典型鈣粘蛋白[1]。如下圖所示，經(jīng)典鈣黏蛋白由三部分組成，一個(gè)胞外域、一個(gè)跨膜域和一個(gè)胞內(nèi)域，其中，胞外域含有五個(gè)鈣粘蛋白結(jié)構(gòu)域（EC1-EC5）。胞外結(jié)構(gòu)域（主要是N端結(jié)構(gòu)域EC1）在兩個(gè)鈣粘蛋白分子之間的同源識別中起關(guān)鍵作用。

經(jīng)典鈣粘蛋白會根據(jù)第一個(gè)EC結(jié)構(gòu)域中是否含有組氨酸-丙氨酸-纈氨酸（HAV）基序進(jìn)一步細(xì)分為 I型和II型。I型鈣粘蛋白分子僅包含五個(gè)成員：上皮鈣黏蛋白（E-Cadherin或CDH1）、神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cadherin或CDH2）、胎盤鈣黏蛋白（P-Cadherin或CDH3）、肌微管鈣黏蛋白（M-Cadherin或CDH15）和視網(wǎng)膜鈣黏蛋白（R-Cadherin或CDH4）；CDH5-12、CDH18-20、CDH22和CDH24為II型鈣粘蛋白分子。除了HAV基序的差異，I型和II型鈣粘蛋白在一些氨基酸殘基上也存在差異。

鈣黏蛋白分子的構(gòu)象僅在Ca²⁺存在下穩(wěn)定，Ca²⁺與多肽鏈的細(xì)胞外部分的結(jié)合是鈣粘蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞間粘附的先決條件。由短的高度保守氨基酸序列組成的鈣結(jié)合位點(diǎn)位于相鄰的細(xì)胞外重復(fù)序列之間[2]。經(jīng)典鈣粘蛋白的胞質(zhì)域可與p120-catenin和β-catenin結(jié)合，而鈣黏連蛋白家族的其他成員（包括原鈣粘蛋白）不結(jié)合連環(huán)蛋白。

Figure 1. The structure of classical Cadherins [3]

在人類中，鈣粘蛋白-6是一種由CDH6（又稱為CAD6或KCAD）基因編碼的蛋白質(zhì)，編碼該蛋白的基因位于五號染色體上。與其他II型經(jīng)典鈣黏蛋白不一樣的是，CDH6 在EC1結(jié)構(gòu)域包含RGD基序，在EC5包含HAV基序，用于穩(wěn)定和聚集相鄰單體。與其他經(jīng)典鈣黏蛋白一樣，CDH6的胞質(zhì)尾可與p120-catenin和β-catenin結(jié)合來調(diào)節(jié)肌動蛋白細(xì)胞骨架。由于β-catenin在Wnt 信號通路中的核心作用，β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與 CDH6 介導(dǎo)的細(xì)胞間粘附之間存在聯(lián)系[4]。

CDH6參與胚胎腎臟的形態(tài)發(fā)生和發(fā)育，并驅(qū)動腎臟形態(tài)發(fā)生所必需的間充質(zhì)-上皮分化，但在成人腎臟中，CDH6的表達(dá)非常弱。在成年人的正常組織中，CDH6的表達(dá)局限于腎臟的腎小管、膽管上皮細(xì)胞等。此外，CDH6也在血小板中表達(dá)，在血小板聚集和血栓形成中起功能性作用。該功能由RGD 基序與αIIbβ3整合素結(jié)合介導(dǎo)，后者發(fā)生構(gòu)象變化并與纖維蛋白原結(jié)合，從而交聯(lián)血小板[5]。

2、CDH6與腫瘤

據(jù)報(bào)道，CDH6在甲狀腺癌、胃癌、胰腺癌和卵巢癌中高表達(dá)，其中，腎癌是最早發(fā)現(xiàn)CDH6高表達(dá)的癌癥。

Figure 2. The expression of CDH6 in various tumors (*Data derived from The Human Protein ATLAS)

關(guān)于CDH6在癌癥中的作用機(jī)制尚不完全清楚，但Rubén A. Bartolomé等人研究表明，CDH6和相關(guān)整合素在卵巢癌和腎癌進(jìn)展中發(fā)揮的關(guān)鍵作用。如下圖所示：在αIIbβ3高表達(dá)的細(xì)胞中，CDH6 就會優(yōu)先結(jié)合αIIbβ3，從而誘導(dǎo)α2β1整合素的激活。整合素的激活會促進(jìn)細(xì)胞粘附、侵襲和增殖，從而導(dǎo)致癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移性播散；在αIIbβ3低表達(dá)的細(xì)胞中，CDH6和CDH17與α2β1 整合素結(jié)合，這種鈣粘蛋白/整合素相互作用通過激活SRC、FAK、AKT和ERK通路促進(jìn)細(xì)胞粘附、遷移、侵襲和增殖。

Figure 3. CDH6 and αIIb/α2 integrins are required for lung homing in ovarian and renal cancer [6]

3、CDH6靶向療法當(dāng)前研究進(jìn)展

由于CDH6在腎癌和卵巢癌患者中，表達(dá)頻繁升高，但在正常組織中表達(dá)受限，CDH6也成為可開發(fā)靶向藥的可選靶點(diǎn)。盡管目前全球范圍內(nèi)僅有三家藥企布局CDH6，均為CDH6 ADC，不過已有候選產(chǎn)品表現(xiàn)出巨大潛力。

• Raludotatug deruxtecan

Raludotatug deruxtecan，代號為DS-6000或R-DXd，是第一三共開發(fā)的一款靶向CDH6的ADC藥物。R-DXd由人源化的CDH6 IgG1單抗、可剪切l(wèi)inker及DXd組成，采用的是第一三共標(biāo)志性的“GGFG四肽linker和Dxd”的組合，DAR值為8。2024年2月，針對適應(yīng)癥卵巢癌被歐盟授予孤兒藥稱號。早期的I期臨床（NCT04707248）研究顯示，R-DXd單藥對晚期卵巢癌患者治療效果積極，總體緩解率（ORR）為46%，疾病控制率（DCR）為98%，中位緩解持續(xù)時(shí)間（mDoR）為11.2個(gè)月。目前，第一三共正在與默克聯(lián)合推進(jìn)針對鉑耐藥性卵巢癌患者的一項(xiàng)II/III期（NCT06161025）臨床研究。

• CUSP06

CUSP06，又稱為AMT-707，是普眾發(fā)現(xiàn)（Multitude Therapeutics, Inc.）開發(fā)的一款CDH6 ADC藥物，由與CDH6具有高結(jié)合親和力的專有抗體、蛋白酶可切割的連接子，以及依沙替康有效載荷（一種TOP1抑制劑）三部分組成，DAR值為8，目前的最高研發(fā)狀態(tài)為臨床I期（NCT06234423)），針對的適應(yīng)癥為晚期惡性實(shí)體瘤和鉑耐藥性卵巢癌。2022年6月，普眾發(fā)現(xiàn)與昂闊醫(yī)藥（OnCusp Therapeutics）就AMT-707（現(xiàn)稱為CUSP06）的開發(fā)和商業(yè)化達(dá)成許可協(xié)議。根據(jù)協(xié)議，昂闊醫(yī)藥將獲得在大中華區(qū)以外的全球范圍內(nèi)獨(dú)家開發(fā)和商業(yè)化AMT-707的權(quán)利。而普眾發(fā)現(xiàn)將獲得預(yù)付款、開發(fā)、注冊和銷售里程碑付款以及分級特許權(quán)使用費(fèi)。

臨床前研究數(shù)據(jù)顯示，CUSP06與基于DXd的CDH6 ADC具有更強(qiáng)的“旁觀者效應(yīng)”。CUSP06 選擇性地與細(xì)胞表面CDH6結(jié)合，并有效地內(nèi)化到 CDH6 陽性卵巢癌細(xì)胞和腎癌細(xì)胞中。CUSP06在體外對幾種CDH6陽性癌細(xì)胞系表現(xiàn)出強(qiáng)大的抗增殖活性。此外，經(jīng)CUSP06治療的兩種CDH6低表達(dá)和高表達(dá)患者來源的異種移植(PDX)模型中也觀察到腫瘤消退[7]。

• HKT-288

HKT-288，又稱為NOV-13，是Novartis Pharma AG開發(fā)的一款CDH6 ADC藥物，包含對CDH6 具有選擇性的全人源抗體、可裂解連接子SPDB和DM4組成。目前該藥已止步于臨床I期，這項(xiàng)首次人體研究（NCT02947152）中，0.75 mg/kg劑量治療組的患者報(bào)告了三例疑似相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)2級不良反應(yīng)：1名患者癲癇發(fā)作，另一名患者失語和腦病。進(jìn)一步的研究無法確定神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)的潛在機(jī)制，因此該研究提前終止。

此外，處于臨床前階段的還有德琪（浙江）醫(yī)藥科技有限公司（Antengene Corporation Co., Ltd.）開發(fā)的雙特異性抗體ATG-106（CD3 x CDH6）和博奧信生物技術(shù)（南京）有限公司（Biosion, Inc.）開發(fā)的CDH6 ADC藥物BSI-709，其中BSI-709項(xiàng)目已終止。而Protein Alternatives SL開發(fā)的單克隆抗體CDH6-RGD目前還處于藥物發(fā)現(xiàn)階段。

4、締碼CDH6相關(guān)產(chǎn)品助力CDH6生物藥開發(fā)

締碼生物科技有限公司是一家專注于可成藥靶點(diǎn)臨床前研發(fā)產(chǎn)品和服務(wù)的生物技術(shù)公司。締碼現(xiàn)可提供CDH6靶點(diǎn)全系列產(chǎn)品與服務(wù)。產(chǎn)品包括活性蛋白、參照抗體和流式驗(yàn)證單克隆抗體；服務(wù)涵蓋多種屬蛋白抗體定制服務(wù)、抗體人源化和親和力成熟服務(wù)。此外，為加速CDH6生物療法的開發(fā)，締碼還制備了CDH6靶點(diǎn)單B細(xì)胞種子庫，最快28天可獲得先導(dǎo)抗體分子；同時(shí)，我們目前已篩選出有26個(gè)CDH6先導(dǎo)分子，均為人猴交叉分子，其中25個(gè)跟鼠也有交叉反應(yīng)，客戶第二天可以拿到分子進(jìn)行功能評估驗(yàn)證；針對部分分子，我們也正在進(jìn)行ADC內(nèi)吞活性及殺傷驗(yàn)證，具體數(shù)據(jù)歡迎垂詢。

• CDH6蛋白&抗體&過表達(dá)細(xì)胞株&移植瘤切片

產(chǎn)品類型	產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱
重組蛋白	PME101111	Human CDH6 Protein, His Tag
	PME-C100044	Cynomolgus CDH6 Protein, His Tag
	PME-M100112	Mouse CDH6 Protein, His Tag
流式抗體	DMC100675	Anti-CDH6 antibody(DMC675); IgG1 Chimeric mAb
參照抗體	BME100232	Anti-CDH6(raludotatug biosimilar) mAb
	BME100234	Anti-CDH6(AMT-707 biosimilar) mAb
生物素標(biāo)記抗體	BME100232B	Biotinylated Anti-CDH6(raludotatug biosimilar) mAb
	DMC100675B	Biotinylated Anti-CDH6 antibody(DMC675); IgG1 Chimeric mAb
過表達(dá)細(xì)胞株	CEL100055	Hu_CDH6 CHO-S Cell Line
移植瘤切片	SLI100004	Balb/C nu HuH7 DiSliceX? SlideSet

• CDH6先導(dǎo)分子研究進(jìn)度

參考文獻(xiàn)：
[1]Brasch, J., Harrison, O. J., Honig, B., & Shapiro, L. Thinking outside the cell: how cadherins drive adhesion. Trends in cell biology, 2012, 22(6), 299–310.
[2]Ivanov DB, Philippova MP, Tkachuk VA. Structure and functions of classical cadherins. Biochemistry (Mosc). 2001, Oct;66(10):1174-86.
[3]Basu, R., Taylor, M. R., & Williams, M. E. (2015). The classic cadherins in synaptic specificity. Cell adhesion & migration, 9(3), 193–201.
[4]Stewart DB, Barth AI, Nelson WJ. Differential regulation of endogenous cadherin expression in Madin-Darby canine kidney cells by cell-cell adhesion and activation of beta -catenin signaling. J Biol Chem. 2000 Jul 7;275(27):20707-16.
[5]Casal, J. I., & Bartolomé, R. A. Beyond N-Cadherin, Relevance of Cadherins 5, 6 and 17 in Cancer Progression and Metastasis. International journal of molecular sciences,2019,20(13), 3373.
[6]Bartolomé, R. A., Robles, J., Martin-Regalado, á., et al. CDH6-activated αIIbβ3 crosstalks with α2β1 to trigger cellular adhesion and invasion in metastatic ovarian and renal cancers. Molecular oncology, 2021, 15(7), 1849–1865.
[7]Wei Lu, Jing Shi, Shu-Hui Liu, Nicole Covino, Xun Meng, Eric D. Slosberg. CUSP06/AMT-707, a new CDH6-targeting antibody-drug conjugate, demonstrates potent antitumor activity in preclinical models [abstract]. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2023; Part 1 (Regular and Invited Abstracts); 2023 Apr 14-19; Orlando, FL. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2023;83(7_Suppl):Abstract nr 6320.