在腫瘤免疫治療中，一方面，我們可以通過靶向腫瘤細(xì)胞上的相應(yīng)的免疫檢查點(diǎn)，阻止癌細(xì)胞的免疫逃逸（比如PD-1、CTLA-4等），另一方面，也可增強(qiáng)免疫細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的攻擊力，本期的主角4-1BB就屬于這一類，它是一種重要的共刺激分子，是T細(xì)胞活化的重要信號(hào)。
4-1BB概述
4-1BB(也稱為CD137) 是一種可誘導(dǎo)的共刺激受體，是細(xì)胞表面糖蛋白，屬于腫瘤壞死因子受體(TNFR)家族的跨膜分子，由腫瘤壞死因子受體超家族成員9（TNFRSF9）基因編碼。
4-1BB主要表達(dá)在活化的CD4+和CD8+T細(xì)胞及自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞），在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞上組成型表達(dá)。此外，4-1BB也表達(dá)在活化的巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞上。
4-1BB Ligand是4-1BB的配體，它主要表達(dá)于活化的抗原呈遞細(xì)胞（APC），如樹突狀細(xì)胞（DC細(xì)胞）、B細(xì)胞、單核細(xì)胞、吞噬細(xì)胞等。
4-1BB和細(xì)胞免疫
眾所周知，T細(xì)胞的活化是免疫應(yīng)答的核心，T細(xì)胞的完全激活和增殖需要需要兩種不同信號(hào)：1第一信號(hào)來自T細(xì)胞表達(dá)的TCR識(shí)別MHC/抗原肽復(fù)合物，傳遞抗原特異性識(shí)別信號(hào)；2
第二信號(hào)由APC的共刺激分子提供，為非特異性協(xié)同刺激信號(hào)。比如CD28：B7，4-1BB：4-1BBL等。
（數(shù)據(jù)來源：Cappell Kathryn M, Nat Rev Clin Oncol, 2021）[1]
4-1BB作為T細(xì)胞共刺激分子，是T細(xì)胞表面一種重要的激活型免疫檢查點(diǎn)分子。
在體外，4-1BB信號(hào)通過上調(diào)細(xì)胞存活基因來促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和活化，同時(shí)，誘導(dǎo)單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等活化，促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌，并抑制活化誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡（Activation induced cell death，AICD）。
4-1BB信號(hào)通路
4-1BB的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴于TRAFS蛋白。
4-1BB聚集并招募TRAF1和TRAF2形成異源三聚體。TRAF2可以與ASK1相互作用并激活A(yù)SK1。ASK1可以激活下游信號(hào)級(jí)聯(lián)，包括JNK/SAPK和P38 MAPK。
通過c-Jun N末端激酶（JNK）途徑，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）途徑，以及通過β-catenin和AKT途徑加強(qiáng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，并通過轉(zhuǎn)錄因子NF-κB調(diào)節(jié)4-1BB信號(hào)，促使細(xì)胞因子的產(chǎn)生和分泌。NF-κB的激活還通過增加抗凋亡基因bcl-XL和bfl-l的表達(dá)來促進(jìn)CD8+ T淋巴細(xì)胞的存活。
（數(shù)據(jù)來源：Chao W et al. Immunological Reviews, 2009）[2]
?4-1BB與腫瘤免疫治療
4-1BB & CAR-T
4-1BB作為共刺激因子結(jié)構(gòu)域（co-stimulatory domains，CD）被廣泛用于CAR-T細(xì)胞治療。
CAR-T（嵌合抗原受體T）細(xì)胞，具有針對(duì)癌細(xì)胞的定向特異性，是一種很有前景的治療癌癥的方法。目前全球已有6款CAR-T產(chǎn)品上市。4-1BB廣泛應(yīng)用于CAR-T產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，諾華的Kymriah的共刺激結(jié)構(gòu)域是4-1BB。作為CAR-T細(xì)胞的胞內(nèi)共刺激結(jié)構(gòu)域，4-1BB可促進(jìn)CAR-T在體內(nèi)的存活和延長(zhǎng)留存時(shí)間。
4-1BB 激活型抗體
利用配體4-1BBL或激活型4-1BB單抗激活4-1BB，可刺激T細(xì)胞和抗原提呈細(xì)胞增殖并分泌細(xì)胞因子，提高機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答水平。開發(fā)靶向4-1BB的單克隆抗體或雙特異性抗體是腫瘤免疫治療的有效手段。
抗4-1BB單抗發(fā)揮的免疫調(diào)節(jié)作用如下：
T細(xì)胞：抗4-1BB單抗誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子分泌（A）。針對(duì)4-1BB和腫瘤抗原(如HER2)的雙特異性抗體可以使免疫效應(yīng)細(xì)胞近距離靶向腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞溶解(D)。2
NK細(xì)胞：在NK細(xì)胞上，4-1BB的刺激可增強(qiáng)ADCC(B)。3
DC細(xì)胞和巨噬細(xì)胞：激動(dòng)性抗4-1BB單克隆抗體也能刺激DCs和巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)，且4-1BB在腫瘤相關(guān)血管內(nèi)皮中表達(dá)(C)。
（數(shù)據(jù)來源：Chester Cariad et al. Blood, 2018）[3]
單克隆抗體
目前已經(jīng)有多種4-1BB激活型抗體進(jìn)入臨床研究階段，包括百時(shí)美施貴寶公司（Bristol-Myers Squibb）的urelumab抗體和輝瑞公司(Pfizer)的utomilumab抗體，這些抗體單獨(dú)或與其它腫瘤治療方法聯(lián)合使用，能夠顯著提高腫瘤治療效率。
ADG106—-天演藥業(yè)
ADG106是靶向4-1BB獨(dú)特表位的激動(dòng)型全人源單克隆抗體，它以一種天然的類似配體的方式激活4-1BB，阻斷4-1BB配體的反向信號(hào)傳導(dǎo)，并通過Fc受體進(jìn)行有效交聯(lián)。
ADG106正在進(jìn)行1b/2a期臨床試驗(yàn)，用于晚期或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤和/或復(fù)發(fā)/難治性非霍奇金淋巴瘤患者。
LVGN6051—-禮進(jìn)生物
LVGN6051是禮進(jìn)生物開發(fā)的一款靶向4-1BB的人源化單克隆激活性抗體。LVGN6051有選擇性地在腫瘤微環(huán)境中局部激活4-1BB，減少正常組織免疫副反應(yīng)。目前，LVGN6051正在開展多項(xiàng)單藥或與PD-1抑制劑帕博利珠單抗聯(lián)合用藥的1期臨床試驗(yàn)。
QL1806注射液—-齊魯制藥
QL1806是齊魯美國(guó)子公司QLSF Biotherapeutics 研發(fā)的一款4-1BB人源化抗體（專利號(hào)：WO2020142624），臨床前研究顯示其在小鼠腫瘤中具有抗腫瘤活性。
但是激動(dòng)型4-1BB抗體也存在一定的副作用。用藥后4-1BB的廣泛表達(dá)導(dǎo)致機(jī)體T細(xì)胞的過度激活，從而帶來潛在的肝毒性和全身免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。
(數(shù)據(jù)來源：Bartkowiak Todd et al. Clin Cancer Res, 2018) [4]
如何確保4-1BB單一療法的最大療效，同時(shí)避免肝毒性？目前主要的策略如下：
瘤內(nèi)（IT）給藥：使腫瘤微環(huán)境中的淋巴細(xì)胞有效活化，可以有效控制用藥劑量，從而減輕這類產(chǎn)品劑量依賴的肝臟毒性。
蛋白水解活化抗體：將掩蔽結(jié)合肽序列與單抗連接，當(dāng)被腫瘤相關(guān)蛋白酶切割，其抗原結(jié)合位點(diǎn)暴露，這使得抗體只有在腫瘤微環(huán)境中才發(fā)揮功能，進(jìn)而避免肝臟毒性。3
無Fc段設(shè)計(jì)：研究發(fā)現(xiàn)4-1BB單抗的腫瘤外毒性與其Fc段有關(guān)。因此，設(shè)計(jì)一種不含F(xiàn)c段的腫瘤靶向4-1BB新型抗體，有望解決毒性問題。4
雙特異性抗體：靶向腫瘤抗原或腫瘤基質(zhì)成分的4-1BB雙特異性抗體，可使誘導(dǎo)的T細(xì)胞激活局限于表達(dá)靶抗原的組織，從而可減輕系統(tǒng)毒性。在小鼠模型中，靶向CD137和腫瘤相關(guān)抗原EGFR的第一個(gè)雙特異性結(jié)構(gòu)體顯示了療效和增強(qiáng)的免疫功能，且沒有明顯的肝臟副作用。這種方法的局限性在于，只能對(duì)表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原的腫瘤有效。
（數(shù)據(jù)來源：Sanmamed Miguel F et al. Sci Transl Med, 2019）[5]
目前，許多藥企針對(duì)4-1BB靶點(diǎn)開發(fā)了雙特異性抗體，部分企業(yè)還布局了四特異性抗體。4-1BB雙特異性抗體
TJ-CD4B—天境生物
TJ-CD4B（又稱ABL111），是由天境生物與韓國(guó)ABL Bio雙方合作開發(fā)的靶CLDN18.2和4-1BB的雙特異性抗體，已經(jīng)獲FDA批準(zhǔn)開展臨床研究。
TJ-CD4B具有獨(dú)特4-1BB結(jié)合表位，使其僅在與Claudin 18.2結(jié)合時(shí)才會(huì)激活T細(xì)胞。TJ-CD4B的這一特性既增強(qiáng)了抗腫瘤免疫力，也降低了因4-1BB廣泛表達(dá)而過度激活T細(xì)胞引起的肝毒性風(fēng)險(xiǎn)和降低全身免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。
TJ-L14B—天境生物
TJ-L14B是天境生物另一款創(chuàng)新雙抗產(chǎn)品，同時(shí)靶向PD-L1和4-1BB，通過阻斷PD-L1信號(hào)并刺激4-1BB信號(hào)，激活T細(xì)胞產(chǎn)生抗腫瘤協(xié)同作用。臨床前研究表明，在給藥劑量相同的前提下，TJ-L14B的抗腫瘤活性既優(yōu)于PD-L1抗體或4-1BB抗體的單藥或聯(lián)合治療又非常持久。天境生物已于2021年4月在美國(guó)啟動(dòng)了TJ-L14B用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤的1期臨床試驗(yàn)（NCT04762641）。
PM1003—普米斯生物
PM1003是一款靶向PD-L1和4-1BB的雙特異性抗體，根據(jù)藥審中心CDE官網(wǎng)公示，普米斯生物的PM1003注射液的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)獲批，擬用于治療晚期惡性實(shí)體瘤。
ATG-101—德琪醫(yī)藥
ATG-101是一種新型PD-L1/4-1BB雙特異性抗體，擬用于治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤及實(shí)體瘤。目前，ATG-101正在轉(zhuǎn)移性/晚期實(shí)體瘤和成熟B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者中，開展首次人體1期試驗(yàn)。
PE0116注射液—懷越生物
LBL-024—維立志博
PD-L1/4-1BB雙抗。
HBM7008—和鉑醫(yī)藥
B7H4/4-1BB新型雙特異性抗體。
ES101—科望醫(yī)藥
ES101最初由Inhibrx公司開發(fā)，科望醫(yī)藥引進(jìn)其大中華區(qū)權(quán)益。ES101是一個(gè)靶向PD-L1/4-1BB的四價(jià)雙特異性抗體，包含4個(gè)結(jié)合域，其中兩個(gè)靶向PD-L1，另外兩個(gè)靶向4-1BB。
ES101與腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1結(jié)合，可以解除PD-1/PD-L1介導(dǎo)的免疫檢查點(diǎn)抑制效應(yīng)；另一方面ES101也可以結(jié)合T細(xì)胞表面的4-1BB，但是只有當(dāng)ES101結(jié)合了PD-L1之后，4-1BB結(jié)合域才有可能驅(qū)動(dòng)4-1BB分子在T細(xì)胞表面的聚集，這就使得4-1BB介導(dǎo)的免疫激活效應(yīng)集中于腫瘤附近的T細(xì)胞，有效降低了潛在的脫靶毒性。
ES101目前處于2期臨床試驗(yàn)階段。
（數(shù)據(jù)來源：科望生物醫(yī)藥科技有限公司官網(wǎng)）[6]4-1BB四特異性抗體
除了雙特異性抗體，部分企業(yè)還布局了四特異性抗體。比如百利藥業(yè)的產(chǎn)品GNC-038、GNC-039、GNC-035。
GNC-038是百利藥業(yè)GNC（Guidance navigation and control）平臺(tái)下首個(gè)進(jìn)入臨床的候選藥物，為靶向CD19、CD3、PD-L1和4-1BB的四特異性抗體。它可以激活T細(xì)胞的第一信號(hào)和第二信號(hào)，通過抗CD19、PD-L1結(jié)構(gòu)域靶向并殺傷腫瘤細(xì)胞。目前GNC-038處于臨床1期試驗(yàn)。
GNC-039將通過同時(shí)結(jié)合EGFRvIII、PDL1、CD3、41BB四個(gè)靶點(diǎn)，激發(fā)機(jī)體形成特異性腫瘤免疫殺傷，穿透血腦屏障、克服腫瘤靶點(diǎn)異質(zhì)性表達(dá)、逆轉(zhuǎn)抑制性的免疫微環(huán)境，從而實(shí)現(xiàn)腫瘤的消除。該抗體在復(fù)發(fā)/難治性或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤患者中的研究目前處于臨床1期。
GNC-035可同時(shí)結(jié)合ROR1、PDL1、CD3、4-1BB四個(gè)靶點(diǎn)，激發(fā)機(jī)體形成特異性腫瘤靶向免疫殺傷，外周激活T細(xì)胞浸潤(rùn)腫瘤并長(zhǎng)期維持對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷、克服腫瘤靶點(diǎn)異質(zhì)性表達(dá)、逆轉(zhuǎn)抑制性的免疫微環(huán)境，從而實(shí)現(xiàn)腫瘤的消除。
聯(lián)合用藥和雙特異性抗體的設(shè)計(jì)是4-1BB抗體很大的發(fā)展趨勢(shì)。
| 產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 |
| 重組蛋白 | PME100011 | Human 4-1BB Protein, mFc-His Tag |
| PME100502 | Human 4-1BB Protein, His tag | |
| PME-M100007 | Mouse 4-1BB Protein, hFc Tag | |
| PME-C100023 | Cynomolgus 4-1BB Protein, hFc Tag | |
| FC驗(yàn)證抗體 | DME100067 | Anti-4-1BB antibody(DM67); Rabbit mAb |
| DME100066 | Anti-4-1BB antibody(DM66); Rabbit mAb | |
| 參照抗體 | BME100037 | Anti-4-1BB (utomilumab biosimilar) mAb |
| 生物素標(biāo)記抗體 | DME100067B | Biotinylated Anti-41BB antibody(DM67); Rabbit mAb |
| DME100066B | Biotinylated Anti-41BB antibody(DM66); Rabbit mAb | |
| BME100037B | Biotinylated Anti-4-1BB (utomilumab biosimilar) mAb |
參考資料：
[1] Cappell Kathryn M, Kochenderfer James N, A comparison of chimeric antigen receptors containing CD28 versus 4-1BB costimulatory domains.[J] .Nat Rev Clin Oncol, 2021, undefined: undefined [2] Chao W, Lin G, Mcpherson A J, et al. Immune regulation by 4-1BB and 4-1BBL: complexities and challenges[J]. Immunological Reviews, 2009, 229(1). [3] Chester Cariad, Sanmamed Miguel F, Wang Jun et al. Immunotherapy targeting 4-1BB: mechanistic rationale, clinical results, and future strategies.[J] .Blood, 2018, 131: 49-57. [4] Bartkowiak Todd, Jaiswal Ashvin R, Ager Casey R et al. Activation of 4-1BB on Liver Myeloid Cells Triggers Hepatitis via an Interleukin-27-Dependent Pathway.[J] .Clin Cancer Res, 2018, 24: 1138-1151. [5] Sanmamed Miguel F, Etxeberría I?aki, Otano Itziar et al. Twists and turns to translating 4-1BB cancer immunotherapy.[J] .Sci Transl Med, 2019, 11: undefined. [6] 科望生物醫(yī)藥科技有限公司官網(wǎng)https://www.elpiscience.com/cn/
